哚哚影音先锋,国产午夜福利片1000无码,精品卡二卡三卡四卡无卡免费,欧美和亚洲黄色首页

您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國(guó)服務(wù)熱線:13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

瀏覽次數(shù):102發(fā)布日期:2024-07-25

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。


Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)澄瀏中路3404號(hào)

掃一掃  微信咨詢

©2024 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問(wèn)量:93977 管理登陸

美女自动脱了内衣视频| 婷婷色国产精品视频一区| 欧美日韩在线成人| 午夜精品国产福利| www.av男人天堂网| 无码日韩AV一区二区三区| 国产98在线 | 传媒| 91 亚洲精品| 色综合久久九无码网中文| 337P日本欧洲亚洲大胆色噜噜| 男同GAY毛片免费可播放| 欧美日韩一区二区三区精品| 国产精品久久久久久精品三级| 欧美日韩三区| 免费日韩无人区码卡二卡3卡| 狠狠综合久久久久综合网| 日本一区二区在线高清观看| 欧美换爱交换乱理伦片| 动漫av一区二区在线观看| 亚洲精品国产综合久久一线| 欧美香蕉爽爽人人爽| 亚洲国产精品久久一线不卡| 操比网| 又大又爽又硬的曰皮视频| 国产午夜福利短视频在线观看| 宅男天堂一区二区三区在线观看| 成人爽a毛片免费| 亚洲欧美日韩高清一区二区三区| 一本精品99久久精品77| 精品二区三区| 中文字幕久久免费福利片| 色一情一乱一伦一区二区三区日本| 欧美日韩国产校园| 亚洲 欧美 日韩一区| 秋霞伦理电影在线看| 无码国产精品免费看| 伊人久久久大香线蕉综合直播| 成人久久免费网站| 一本无码人妻在中文字幕免费| 精品一区二区三区日韩| 国产成人亚洲综合网站小说|